人胰腺腺泡上皮癌細胞（HPAC）HPAC細胞于1985年從一名患有導管源性中分化至高分化胰腺癌的女性胰腺頭部切除的原發性腫瘤的裸鼠異種移植物中衍生而來。

【細胞名稱】人胰腺腺泡上皮癌細胞

【細胞別名】Hpac

【種屬來源】人

【組織來源】胰腺

【細胞形態】貼壁細胞

【生長特性】上皮細胞樣

【培養體系】DMEM/F12＋2μg/ml Insulin＋5μg/ml Transferrin＋40ng/ml Hydrocortisone＋10ng/ml EGF＋5% FBS＋1% P/S

【傳代比例】1:3-1:6，每 2-3 天換液一次

【培養條件】氣相：95%空氣+5%二氧化碳，溫度：37℃

【凍存條件】凍存液：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO；存儲條件：液氮

【安全性】建議在二級生物安全臺內操作，并做好個人防護。

【用途】僅供科研使用

二、復蘇及傳代方法

1、細胞株的復蘇（凍存管）

（1）將凍存管在37℃水浴鍋中迅速全融化，并適當輕輕搖晃促融?？焖?、全融化可以提高細胞的復蘇效果。

（2）打開凍存管前時用75%酒精擦拭細胞凍存管外壁。

（3）將全融化的細胞直接離心，或者轉移至無菌15ml或其它合適無菌離心管中，400g離心5min，吸除上清，注意不要吸走細胞沉淀，然后用新鮮*全培養液重懸后轉移至培養器皿，混勻，置于CO2培養箱37℃培養。

（4）第二天視貼壁或生長狀態，更換培養液。

注意：如果收到的凍存管不能及時進行復蘇，還請置于-80℃或液氮中進行暫存，并盡快復蘇進行培養。

2、細胞株的復蘇（T25瓶）

（1）將收到T25瓶脫外包后用75%酒精擦拭瓶外壁。

（2）置于倒置顯微鏡下觀察細胞狀態，看是否有異常；無異常后，采用移液器移去多余的培養液，置于CO2培養箱37℃培養過夜。

（3）第二天視貼壁或生長狀態，考慮進行換液或傳代，傳代比例參考1:2~1:4。

三、注意事項

1、每支凍存管約含1×106個細胞，體積為1ml，預期存活率60-90%，建議復蘇至1個T25瓶或1個6cm培養皿中。如果復蘇后存活率較低，可以消化后轉移至3.5cm培養皿/T12.5瓶中，這樣細胞生長會更好。

2、如果本產品是常溫運輸，并且是培養瓶中充滿*全培養液的貼壁細胞，收到細胞后：

（1）及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。

（2）用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2~4小時，以便穩定細胞狀態。

（3）仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息。

（4）靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態。

3、如果細胞密度超過85%請盡快進行傳代操作；如果懸浮的細胞較多，請將培養瓶置于培養箱中靜置過夜以使懸浮的細胞再次貼壁。如果收到的是常溫運輸的離心管裝的懸浮細胞，可以直接取出轉移至培養皿或培養瓶中培養。若培養液顏色正常則保留培養液繼續培養，并且在*次更換培養液時，保留一半原培養液，并加入一半新鮮培養液，這樣可以盡量避免由于培養液或血清差異導致細胞生長的不適應，確保細胞良好的生長狀態。

4、細胞培養請在生物安全柜臺中進行操作，并嚴格遵守無菌操作。

上海牧榮生物科技有限公司

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